Diagnóstico paleoparasitológico de protozoários do gêneroLeishmania Ross, 1903 (Kinetoplastida, Trypanosomatidae)em material arqueológico da América do Sul / Parasitological diagnosis paleo protozoa of the genus Leishmania Ross, 1903 (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) in archaeological material from South America

Espécies do gênero Leishmania (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) são agentescausadores de leishmanioses, que representam um complexo de doenças com variado espectroclínico e diversidade epidemiológica que, em alguns países, constituem-se em grave problema de saúde pública. A origem e evolução das leishmanioses têm estado em debate em seus aspectos clínicos e parasitológicos. Com a introdução da paleoparasitologia baseada na aplicação de diferentes técnicas, tornou-se possível a recuperação de vestígios do parasito,assim como o diagnóstico de infecções em humanos e em outros hospedeiros no passado. Os objetivos desta pesquisa foram diagnosticar parasitos do gênero Leishmania spp., em materiais arqueológicos da América do Sul por meio de técnicas moleculares e imunológicas. Estes são os primeiros registros de recuperação de DNA de Leishmania sp. em material arqueológico do Brasil, assim como também o primeiro registro deL. tarentolae em material antigo. Dois pares de primers que amplificam outras regiões de L. tarentolae foram desenhados para o estudo no intuito de averiguar se outros trechos de DNA desta espécie também teriam se preservado no material, tendo os mesmos não amplificado.Duas explicações são possíveis: devido a natureza fragmentada do DNA antigo o mesmo não se conservou de maneira homogenia no material, ou pode se tratar de um infectron, o que também é um dado relevante pois é uma assinatura da relação estabelecida entre parasito e hospedeiro...

Species of the genus Leishmania (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) are causativeagents of leishmaniasis, which represents a complex disease with varied clinical spectrum and epidemiological diversity that, in some countries, constitute a serious public health problem. The origin and evolution of leishmaniasis has been under discussion in clinical and parasitological aspects. By the introduction of paleoparasitology based on the application of different techniques, as well as the diagnosis of infections in humans and other hosts in the past. Theaims of this research were: diagnosis by molecular PCR technique parasites of the genus Leishmaniain archaeological materials of South America, with the comparison of the sequences obtained from the GenBank for both recent and archaeological material, diagnosis through serological techniques: rapid test DPP and Western Blot, anti-Leishmania antibodies in the samples submitted to PCR, with subsequent comparison of these serological techniques with the previous lyused molecular technique and thus contribute to the knowledge of paleoparasitology of leishmaniasis, giving contributing to studies on the origin and evolution of Leishmania genus...

Análise paleogenética de treponemas em remanescentes humanos do período histórico brasileiro (séculos XVII ao XIX) / Paleogenética analysis of treponemes in human remains doperíodo Brazilian history (seventeenth to nineteenth centuries)

Objetivos: Verificar a presença de treponematoses através da análise paleogenética em remanescentes humanos dos séculos XVII ao XIX da cidade do Rio de Janeiro. Avaliar o diagnóstico molecular de Treponema pallidum em soros de indivíduos positivos para sífilis, assim como determinar o perfil parasitológico destes pacientes. Metodologia: A análise paleogenética de Treponemas foi aplicada em 48 indivíduos provenientes dos sítios arqueológicos Igreja Nossa Senhora do Carmo (INSC) e Cemitério da Praça XV (CPXV), datados dos séculos XVII ao XIX. Material ósseo, constituído principalmente de fragmentos de crânio, foi selecionado para a análise paleogenética que seguiu estritamente os procedimentos de estudos de a DNA. Foi realizada extração de a DNA seguida de hibridização de a DNA em membrana de nylon pelo método de Dot Blot, incluindo controles negativos (DNA humano) e positivos (DNA de cepas referências de T. pallidum, Nichols (T. p. ssp. pallidum) e CDC2 (T. p. ssp. pertenue). Aplicou-se a técnica molecular para detectar a presença de Treponemas com 3 alvos moleculares para T. pallidum, 47KDa, DNA Pol A e 15KDa. A eficiência de detecção molecular de T. pallidum foi previamente avaliada pela técnica de PCR em cepas referências Nichols e CDC2, e em 18 amostras de soro de pacientes com sífilis atendidos em Unidades de Saúde do Rio de Janeiro. O diagnóstico molecular de treponematoses em soros foi avaliado pela técnica de PCR e adicionalmente, registros de pacientes com sífilis foram analisados para avaliar o perfil parasitológico dos mesmos. (...)

Objectives: To check the presence of Treponematosis in human remains of centuries XVII to XIX from the Rio de Janeiro city. To determine the parasitologicalprofile of individuals with syphilis, and to evaluate the molecular diagnosis of T.pallidum in serum. Methodology: The paleogenetic analysis of Treponemas wasapplied in 48 samples of the Nossa Senhora do Carmo Church (INSC) and CemiteryPraça XV (CPXV) archaeological sites, dating of the XVII to XIX centuries, in orderto detect the presence of Treponematosis. Was performed aDNA extraction followedof aDNA hybridization in nylon membrane by Dot Blot method., including negative(Human DNA) and positive (T. pallidum DNA of references strains, Nichols (T. p.ssp. pallidum) and CDC2 (T. p. ssp. pertenue) controls. The molecular technique was applied to detect the presence of Treponemas using 3 molecular targets for T.pallidum, 47KDa, DNA Pol A e 15KDa. The efficiency of molecular detection of T. pallidum was previously assessed by PCR in the references strains, Nichols andCDC2, and in 18 serum samples from patients with syphilis from Units of Health inRio de Janeiro. The molecular diagnosis of treponematosis in serum was evaluatedby PCR technique and additionally, medical records of patients with syphilis wereanalyzed to assess their parasitological profile. (...) Conclusions: Infection by T. pallidum wasdetected in individuals of the historical period from the Rio de Janeiro city. Theprevalence of infection by T. pallidum was similar in both archaeological sites,regardless of different ethnicities and socioeconomic levels, which werecharacteristic of the populations buried in the two sites of study. The technique ofaDNA hybridization with 3 molecular targets proved to be efficient in detecting treponematose in bone material. The molecular targets applied are sensitive to detected DNA of T. pallidum in patients with serological titer under 1:8 and inreactors weakly serum. The frequency of request for parasitological examination ranges from 2 to 10 per cent.